תוכן ההודעה ניתן לעריכה מהמערכת ניהול בחלק של עמודים

ראשי > ניסויים > כימיה > TLC או כרומטוגרפיה

שם כותב הניסוי: דן ויינטל

פורסם ב 01/06/2023
עודכן ב 25/06/2023
כימיה כימיה

TLC או כרומטוגרפיה

איך מנקים חלבונים ונוגדנים? או חומרים שמשמשים כתרופות? 

בהרבה מיקרים מייצרים את התרופה ע"י תאים חיים או בצורה כימית ואז צריך להפיק אותה ולנקות.

הליך ההפרדה והניקוי נעזר בכרומטוגרפיה - בניסוי זה נבין כיצד זה עובד.

כרומטוגרפיה או הפרדת חומרים מאפשרת זיהוי, הפקה ובידוד של חומרים שונים. תהליך זה משמש לניקוי מולקולות קטנות ועד חלבונים הן בתעשיה והן למתרות אנליטיות כמו איפיון של חומרים שונים. כיצד זה עובד?

הרעיון הבסיסי אומר כי יש לנו חלק\פאזה נייחת, פאזה ניידת והדוגמא בה נמצא החומר שמעניין אותנו.

הפאזה הנייחת בניסוי זה היא נייר והנייר לא זז לשום מקום.

הפאזה הניידת היא נוזל - אתנול (כהל), הנוזל זורם על פני הפאזה הנייחת.

הדוגמא - טוש והצבע של הטוש הוא החומר אותו אנו רוצים לבודד.

הרעיון הוא שהחומר אותו אנו רוצים נמס בפאזה הניידת וזורם איתה עלפני הפאזה הנייחת, אם זאת החומר שלנו ניקשר גם לפאזה הנייחת.

ככל שהקישור לפאזה הנייחת חזק יותר החומר ינוע לאט יותר.

ע"י שינוי בממס ושינוי הפאזה הנייחת נוכל להפריד חומרים שונים.

 

רכיבי הניסוי

הכנה

  1. גיזרו את הנייר למלבן ארוך כך שיכנס למבחנה.
  2. ציירו נקודה עבה עם כל אחד מהטושים: הקפידו על רווח של לפחות 3 מילימטר בין נקודה לנקודה, שימו לב שכל הנקודות נמצאות באותו מרחק מתחתית הנייר. בתמונות למטה בחרתי בעט (מימין), טוש כחול, אדום ושחור. מומלץ לנסות מספר טושים וגם לערבב בניהם.
  3. מזגו למבחנה 5מ"ל אתנול 
attention

כאשר אתם מציירים את הנקודות עם הטושים הקפידו על רווח של 2ס"מ מתחתית הנייר. חשוב מאוד שהנוזל לא יכסה את הנקודות!

מהלך הניסוי

  • הכניסו את הנייר כך שיטבול באתנול אך הנקודות שציירתם ימצאו מעל האתנול (באזור יבש) ראו תמונה למטה
  • תוך זמן קצר האתנול ינוע במעלה הנייר היבש 
  • האתנול יגיע אל נקודות הטוש ויגרור אותן למעלה

תוכלו לראות כיצד חומרים שונים נעים בצורה שונה.

שימו לב, הנייר הידרופילי (אוהב מים) בעוד שהאתנול הוא ממס אורגני ולכן הידרופובי יחסית. מכאן, החומר שנע הכי לאט הנו ההידרופילי ביותר. החומר ההידרופילי ביותר יקשר חזק לנייר ולכן יהיה קשה לאתנול למשוך אותו קדימה. האתנול נע למעלה אל הנייר היבש.

במיקרה שמוצג כאן, הטוש השחור הוא ההידרופילי ביותר בעוד הטוש הסגול ההידרופובי ביותר (שונא  מים).

 

הצעה להפעלה

למדתם את יסודות הכרומטוגרפיה ועכשיו תוכלו לנסות חומרים שונים ותערובות שונות. שמן, צבעי מאכל ותבלינים.

אם אתם מחפשים תוכנית הפעלה, כתבו מכתב ובו חידה, סמנו נקודה עם טוש ועכשיו תשאלו מי כתב את המכתב. יש שלושה חשודים ולכל חשוד טוש. חבריכם יצתרכו לגזור את המכתב, לסמן נקודה עם כל טוש ולהריץ את הניסוי. הטוש שירוץ כמו הנקודה במכתב הוא הטוש של כותב המכתב.

attention

בתמונת סיום הניסוי תוכלו לראות כי הטוש האדום מורכב מצבע כתום וצבע אדום סגול.

 

תגובות